本发明提供了一种肺癌相关分子标志物基因突变的crRNA、检测试剂盒与检测方法，所述crRNA包括：EGFR‑T790M突变位点的crRNA：如SEQ ID NO.16‑17任一所示；EGFR‑L858R突变位点的crRNA：如SEQ ID NO.18‑19任一所示；BRAF基因突变位点的crRNA：如SEQ ID NO.20‑21任一所示；ALK基因突变位点的crRNA：如SEQ ID NO.22‑23任一所示；ROS1基因突变位点的crRNA：如SEQ ID NO.24‑25任一所示。本发明设计与肺癌相关分子标志物基因突变靶点相关的5个crRNA，运用此crRNA结合CRISPR‑cpf1系统进行突变检测，此方法具有简单、速度快、灵敏度高、特异性强的特点。
本发明公开了一种检测布鲁氏杆菌的crRNA、试剂盒及检测方法，其中crRNA选自如下所示的序列：crRNA1：其序列如SEQ ID NO.6所示；crRNA2：其序列如SEQ ID NO.7所示；crRNA3：其序列如SEQ ID NO.8所示；crRNA4：其序列如SEQ ID NO.9所示。本发明基于布鲁氏杆菌Omp25基因设计并筛选crRNA，同时结合CRISPR‑Cas12a系统及RPA等温扩增技术，可在短时间内检测待测样本中是否存在布鲁氏杆菌，操作简单、检测速度快、成本低、可多次重复检测
所述试剂盒包括crRNA，所述crRNA为crRNA(WT)和crRNA(Vac)的组合，crRNA(WT)的序列如SEQ ID NO.1所示，crRNA(Vac)的序列如SEQ ID NO.2所示。或通过crDNA(WT)和crDNA(Vac)转录得到crRNA，crDNA序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。然后根据该差异设计crRNA，实现了仅用一个试纸条区分待测样品是布鲁氏杆菌野生菌株或布鲁氏杆菌S2疫苗株，有效解决了现有技术中S2疫苗株和野生菌株分别鉴定区分的问题。
本发明提供了一种结肠癌相关分子标志物基因突变的crRNA、检测试剂盒与检测方法，所述crRNA包括：KRAS‑exon2突变位点的crRNA：其序列如SEQ ID NO.14‑16任一所示；KRAS‑exon3突变位点的crRNA：其序列如SEQ ID NO.17‑18任一所示；NRAS‑exon2基因突变位点的crRNA：其序列如SEQ ID NO.19‑20任一所示；BRAF基因突变位点的crRNA：其序列如本发明设计与结肠癌相关分子标志物突变靶点的4个crRNA，结合CRISPR‑cpf1系统进行突变检测，此方法具有速度快、灵敏度高、特异性强的特点。
所述试剂盒包括crRNA，crRNA选自crRNA(WT)或crRNA(Vac)，crRNA序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示。或通过crDNA(WT)或crDNA(Vac)转录得到crRNA，crDNA序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示。然后根据该差异设计crRNA，并结合CRISPR系统和RPA等温扩增技术，实现了仅用一个试纸条同时区分待测样品是布鲁氏杆菌野毒株或布鲁氏杆菌A19疫苗株，有效解决了现有技术中A19疫苗株和野毒株分别鉴定区分的问题
